室内环境微生物控制规范标准的制定和管理

　　良好的室内环境质量是伴随着科技发展和生活水平的提高，人们对健康舒适的生活和工作环境更高追求。但是如何评判室内环境质量的优劣呢？室内环境是由建筑设计、材料、设备和日常维护共同创造的环境，必须采用相应的技术和方法对室内环境营造的各个环节进行检验和评价。就室内环境中的微生物相关而言，必然需要室内环境微生物浓度的评价和控制标准、室内特殊用品上的微生物污染评价、微生物的采样检测技术方法、抗菌材料的抗菌性能、净化产品的室内微生物的净化灭菌效果等一系列室内环境微生物有关的标准规范。

　　1、室内环境微生物标准
　　发达国家的室内环境质量控制有一系列的标准、导则、规范和政策，且多为推荐标准，总体上可以归纳为3类：公共场所环境质量标准、住宅室内环境指导标准、暖通空调的行业标准。不同国家的侧重点有所差别。美国室内环境质量管理机构国家环境保护署（EPA）、国立职业安全与健康研究所（NIOSH）、国立卫生研究所及这些部门组成室内空气质量管理跨部门委员会，都在进行室内环境微生物的检测技术、污染源特征分析和控制措施研究。我国的香港特区也在1999年发布了《室内空气素质管理》的咨询文件，作为强制性法规，具有指令性作用，可为设计方、施工方、供货方提供依据，也可以为业主和大楼租赁者提供更多的综合信息，对改善室内空气品质起到了重要作用。
　　我国近几年先后制定了适用不同场所的体系齐全的室内环境中的微生物污染的评价标准和技术标准，但这些标准总体上还是在室内环境质量标准的一部分控制指标上的限制，包括空气质量和室内用品的标准评价主要有：《室内空气质量》、《旅店业卫生标准》、《文化娱乐场所卫生标准》、《公共浴室卫生标准》、《理发店、美容店卫生标准》、《游泳场所卫生标准》、《体育馆卫生标准》、《图书馆、博物馆、美术馆、展览馆卫生标准》、《商场（店）、书店卫生标准》、《医院候诊室卫生标准》、《公共交通等候室卫生标准》、《公共交通工具卫生标准》、《饭馆（餐厅）卫生标准》、《公共场所用品卫生标准》、《足浴服务卫生要求》、《生活饮用水卫生标准》、《洁净厂房设计规范》、《通风与空调工程施工质量验收规范》、《洁净厂房设计规范》。相应的检测技术标准主要有：《公共场所空气微生物检验方法　细菌总数测定》、《公共场所茶具微生物检验方法　细菌总数测定》、《公共场所毛巾、床上卧具微生物检验方法　细菌总数测定》、《游泳池水微生物检验方法　细菌总数测定》、《公共场所浴盆、脸（脚）盆微生物检验方法　细菌总数测定》、《生活饮用水标准检验法》、《公共场所茶具微生物检验方法　大肠菌群测定》、《公共场所毛巾、床上卧具微生物检验方法　大肠菌群测定》、《理发用具微生物检验方法　大肠菌群测定》、《游泳池水微生物检验方法　大肠菌群测定》、《公共场所浴盆、脸（脚）盆微生物检验方法　大肠菌群测定》、《生活饮用水标准检验法》、《理发用具微生物检验方法　金黄色葡萄球菌测定》、《公共场所拖鞋微生物检验方法　霉菌和酵母菌测定》、《医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方法》、《医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》
　　室内空气中的微生物指标是评价室内空气质量的重要标准。空气中微生物质量的好坏往往以细菌总数指标来衡量。由于空气中病原微生物含量较少和直接从空气中培养病原微生物的技术较复杂，检出率低，故通常并不以病原微生物作为空气污染的指标，而多采用空气中细菌总数和溶血性、绿色链球菌作为室内空气质量，微生物污染状况和预防呼吸道传染病的评价指标。

　　空气细菌总数：一般情况下空气中的细菌总数越高，存在致病性微生物（细菌、真菌、病毒）的可能性越高，可使人感染而致病。很多因素影响室内空气中细菌数量，如房间大小、室内人员多少、通风换气情况、采光、室内温度、湿度、灰尘含量、周围环境等。因此，室内细菌总数值变化较大。苏联学者提出夏季室内空气中细菌总数≥2500 CFU/ m3为污染空气。香港室内空气质量标准规定，空气质量十分良好时空气中细菌总数应小于500 CFU/ m3，室内空气质量能保证大众健康时，空气中细菌总数应小于1000 CFU/ m3 。办公楼实地采样20%的样品超过1000 CFU/ m3。 我国公共场所卫生标准中对旅店业室内空气中细菌总数作出规定，采用撞击法采样时，普通旅店、招待所应小于2500 CFU/ m3。

　　细菌总数是指在人体呼吸平面采集一定数量含微生物的空气,其微生物在普通营养琼脂培养基上,于37℃培养24h后生长出的菌落数。以cfu/m3或每皿菌落数表示。由于受人为的采样方法和单一的培养条件限制,有些细菌不能采集到或培养出，所得到的“细菌总数”不能代表实际空气中全部细菌,也不能说明是否有病菌存在,只能说明空气受到生物性污染的程度。细菌是单细胞的微小原核生物,其形态、生长、繁殖和数量受环境理化学因素影响。温度对细菌数影响较大,冬季气温较低,一些细菌繁殖、生长受限,室内空气细菌数量减少。湿度过低的空气会使细菌抵抗力降低,繁殖体细菌容易趋向死亡。紫外线有杀菌作用,尤其是波长254nm的紫外线可使菌体核酸最大吸收,生物活性改变,菌体死亡。日光中紫外线透过玻璃窗虽可减弱强度,但仍有一定杀菌效果。气流不仅可将室外细菌带入室内,又可以将地面、墙壁的含菌粒子扬起,增加空气细菌数量。空气轻离子通过吸附带菌粒子形成重离子沉降地面,减少空气细菌数。高浓度负离子还有抑菌或杀灭作用。空气化学污染物如SO2、NO2、CO等，在不同环境条件不同浓度下,对空气微生物可呈现杀灭或保护作用。室内空气细菌数量除与环境理化因素有关外,还与室内卫生状况、人员数量、活动方式及空气污染程度等有关。因此，可以根据空气细菌总数值,初步判断空气污染程度或评价空气质量的改善效果。

　　测定方法评价细菌是体积微小、表面带负电荷、有生命现象的生物。在室内以气溶胶形式、不均匀地分布在各处空间，时空变化较大。在此状态下,不同的布点、采样、采样时机、培养和计算方法，又可增加测定结果与实际情况的更大出入。国内目前使用的采样方法主要是两类：1、撞击式(LMC-1型离心式空气生物采样器、克罗托夫采样器、安德森采样器、JWC型空气生物采样器):空气通过采样器,使含菌气流撞击到琼脂平面,细菌即留滞在琼脂表面上,根据培养计数和气样量,算出空气细菌总数。该法对细菌捕获率较高,定量相对准确,但需特殊仪器,在基层不易推广,也存在一定问题,如采气量受电流、电压的变化影响，现场采样面小,采样时间短,致使测定结果的代表性不够强等。2、平皿沉降法:平皿琼脂表面接受自然沉降的含菌粒子,并以每100cm2平皿,5min接受的细菌相当于10L空气的含菌量为基础,推算每立方米空气含菌量。实际调查研究表明,平皿沉降法测定的细菌总数数量比撞击法多，平皿沉降法易受气流影响,重复样品偏差比撞击法大也是该法不足之处。尽管如此,平皿沉降法优点很多,如不需特殊仪器,操作简便,采样面大,与撞击法的测定结果密切相关。为了便于平皿沉降法调查资料的可比性,建议统一布点、采样的数量和方法,培养基成分、培养温度和时间。为了提高最低检出量和减少重复样品的偏差[14],每个调查点最少应设置5个直径9cm平皿,暴露时间保证10min。

　　虽然微生物在空气中是不均匀的分散相,时空变化也较大,任何方法采样的结果都不能百分之百得到微生物实际数量,培养基种类,培养温度和时间也都限制一些微生物长出的数量,仪器采样也只是比平皿沉降采样更接近一些实际数量,但实际调查结果表明,仪器法和平皿沉降法的测定结果都能反映空气微生物污染趋势。

　　空气链球菌：空气链球菌主要是绿色链球菌(甲型)和溶血性链球菌(乙型)数量的总和。链球菌在自然界中分布很广,常寄居在人类鼻咽腔和肠道内。链球菌种类很多,有能致病的,也有非致病的。根据链球菌在血琼脂平板培养基上的溶血特征,可以分为3类：1、甲型溶血性链球菌:在菌落周围,有绿色的半透明溶血环。致病力较低,多为条件致病菌,机体抵抗力下降或发生某些损伤时,可引起一些疾病发生。正常人群鼻咽部带菌率可达70%左右。2、溶血性链球菌:该菌能产生溶血素,菌落周围有较宽而透明的溶血环。此型菌致病力较强,常引起人类和动物多种疾病。正常人群鼻咽部带菌率可达20%左右,流行期间带菌率增高,可达50%～79%。3、丙型链球菌:不产生溶血素,菌落周围无溶血环,通常无致病性,常存在于乳类和粪便中,有时偶尔引起感染。

　　室内的链球菌,绝大多数是绿色和溶血性链球菌,寄居正常人上呼吸道,可通过飞沫播散到周围空气,其数量与人群密度和空气污浊程度有关,卫生学意义较大。因此,常把绿色和溶血性链球菌作为空气卫生监测或空气污染评价指标。链球菌在空气中存活时间较长,抵抗力较其他致病菌强,在痰液及其他体液干燥后,能生存数星期以上,有代表一般致病菌抵抗力的意义。同时又有代表空气污染程度的意义,据调查,在长期无人居住的室内很少测出,而在人员拥挤(教室、影剧院、候诊室等)或密闭的空调室内检出率高,数量也多。国内外空气链球菌测定多使用血平皿沉降法,其布点、采样方法、采样时间、培养条件和计算方法均同细菌总数的平皿沉降法。由于空气链球菌卫生调查资料太少,标准制订依据不够充分,故建议的链球菌标准仅做为参考使用。